Окраска микроорганизмов (крашение микробов) — комплекс методов и приёмов для исследования внешнего и внутреннего строения микроорганизмов, метод микробиологической техники, позволяющий различать виды микроорганизмов . Метод широко используют в прикладной бактериологии для определения формы, размеров, строения, локализации, взаимного расположения микробов , структуры их органелл . Без окраски микробы, кроме некоторых грибов , в световой микроскоп практически не видны, вследствие их малой контрастности . После обработки мембраны и/или органеллы микробов приобретают контрастирующую с фоном окраску .

Общие сведения о методе

Препараты микробов подвергают действию химических реагентов, обычно — красителей , или тетраоксида осмия . В результате физико-химического процесса взаимодействия красителя с химическими соединениями объектов, с целью искусственного придания ему определённой окраски, появляется возможность определить вид микроорганизма, или хотя бы тип его мембраны (см. окраска по Граму ).

Способы крашения разделяют на витальный , поствитальный и негативный , последний может быть витальным и поствитальным.

Витальный способ окраски

Для витального (прижизненного) крашения применяют 0,2-0,001 % водные растворы метиленового и , нейтральрот и конго красный , которые добавляют в придавленную или висячую капли культуры. Этим способом выявляют спирохеты , простейшие , определяют подвижность бактерий , иммунное набухание капсулы, но использование его требует строгого соблюдения правил, исключающих лабораторное заражение.

Поствитальные способы окраски

Способы окраски фиксированных препаратов (поствитальные) разделяют на простые и сложные . При простых способах красящие растворы фуксина Пфейффера (экспозиция 1-2 мин), щелочного метиленового синего (3-5 мин) наносят на фиксированный препарат, так, чтобы он полностью покрыл мазок, краситель сливают, препарат промывают струйкой воды, встряхивают, высушивают и микроскопируют.

Простые способы позволяют судить о величине, форме, локализации, взаимном расположении отдельных клеток, но с их помощью нельзя установить структуру микробов и часто их дифференцированное отношение к красителям.

Из сложных способов окрашивания бактерий в основном используют дифференцированный способ Грама , выявление кислотоустойчивости по Цилю — Нельсену , определение волютиновых зёрен по или , дифференцирующий способ Романовского — Гимзы , негативно-позитивный способ определения капсулы по Гинсу — Бурри, выявление спор по Пешкову или Цилю — Нельсону и др.

Для окраски простейших применяют способ Романовского — Гимзы и окраску гематоксилин-эозином .

Грибы исследуют неокрашенными или способами Грама, Циля — Нельсона, Леффлера, Романовского — Гимзы, а также раствором Люголя , и др.

См. также

• Метод Грама
• Метод Пешкова
• Метод Циля — Нельсена
• Окраска по Романовскому — Гимзе

Литература

• Барыкина Р. П. и др. Справочник по ботанической микротехнике. Основы и методы. — М. : Изд-во МГУ, 2004. — 312 с. — 2000 экз. — ISBN 5-211-06103-9 . — УДК 58:57.08