Interested Article - Звёздная активность
- 2020-10-15
- 2
Звёздная активность — явление снижения или изменения специфичности эндонуклеаз рестрикции , ведущее к неизбирательному разрезанию (рестрикции) ДНК при осуществлении реакции in vitro . Звёздная активность возникает в условиях отличных от оптимума для данного фермента. В результате звёздной активности происходит рестрикция в неканонических сайтах, иногда происходит полная потеря специфичности.
Причинами звёздной активности могут быть:
- низкая ионная сила буферного раствора,
- высокий рН ,
- высокая концентрация глицерина (> 5% v/v),
- присутствие диметилсульфоксида (ДМСО) ,
- наличие Mg 2+ (в случае эндонуклеазы) и др.
Высокая концентрация глицерина имеет особенно важное значение в лабораторной практике, поскольку коммерчески доступные эндонуклеазы рестрикции обычно поставляются в буфере , содержащем значительное количество глицерина (50% v/v). Поэтому недостаточное разбавление раствора фермента может привести к звездной активности.
Внешние ссылки
- от 11 января 2018 на Wayback Machine -
- от 27 сентября 2009 на Wayback Machine - Fermentas
- - подробный список звёздных активностей от TaKaRa
- H; Wei; Therrien, C; Blanchard, A; Guan, S; Zhu, Z. The Fidelity Index provides a systematic quantitation of star activity of DNA restriction endonucleases (англ.) // (англ.) (: journal. — 2008. — Vol. 36 , no. 9 . — P. e50 . — doi : . — . — PMC .
Ссылки
- Robinson, CR; Sliger, S. G. Molecular Recognition Mediated by Bound Water : A Mechanism for Star Activity of the Restriction Endonuclease EcoRI (англ.) // (англ.) (: journal. — 1993. — Vol. 234 , no. 2 . — P. 302—306 . — doi : . — .
- 2020-10-15
- 2