Interested Article - Пируваткиназа

ainsleigh
  • 2021-04-04
  • 1

Пируваткиназа (Pyruvate kinase) — это фермент из класса трансфераз ( шифр КФ ), участвующий в последней стадии гликолиза . Он катализирует перенос фосфатной группы из фосфоенолпирувата (PEP) в аденозиндифосфат (ADP), образуя одну молекулу пирувата и одну молекулу АТФ . Пируваткиназа присутствует у животных в четырёх различных тканеспецифичных изозимах, каждый из которых обладает определёнными кинетическими свойствами, необходимыми для адаптации к изменениям метаболических потребностей различных тканей.

Изоферменты позвоночных

Четыре изофермента пируваткиназы, экспрессируемые у позвоночных : L ( печень ), R ( эритроциты ), M1 (мышцы и мозг) и M2 (ткань раннего плода и большинство тканей взрослого человека). Изоферменты L и R экспрессируются геном PKLR , тогда как изоферменты M1 и M2 экспрессируются геном . Изоферменты R и L отличаются от M1 и M2 тем, что они регулируются аллостерически . Кинетически изоферменты R и L пируваткиназы имеют два различных конформационных состояния; один с высоким сродством к субстрату и один с низким сродством к субстрату. R-состояние, характеризующееся высоким сродством к субстрату, служит активированной формой пируваткиназы и стабилизируется PEP и фруктозо-1,6-бисфосфатом (FBP), способствуя гликолитическому пути. Т-состояние, характеризующееся низким сродством к субстрату, служит инактивированной формой пируваткиназы, связанной и стабилизированной АТФ и аланином , вызывая фосфорилирование пируваткиназы и ингибирование гликолиза . Изофермент M2 пируваткиназы может образовывать тетрамеры или димеры. Тетрамеры имеют высокое сродство к PEP, тогда как димеры имеют низкое сродство к PEP. Ферментативная активность может регулироваться фосфорилированием высокоактивных тетрамеров PKM2 в неактивные димеры .

Ген PKM состоит из 12 экзонов и 11 интронов . PKM1 и PKM2 представляют собой разные продукты сплайсинга M-гена ( PKM1 содержит экзон 9, а PKM2 содержит экзон 10) и отличаются только 23 аминокислотами в пределах 56-аминокислотного участка (а.о. 378—434) на их карбоксиконце . Ген PKM регулируется с помощью гетерогенных рибонуклеотидных белков, таких как hnRNPA1 и hnRNPA2 . Мономер PKM2 человека состоит из 531 аминокислоты и представляет собой одну цепь, разделенную на домены A, B и C. Разница в аминокислотной последовательности между PKM1 и PKM2 позволяет PKM2 аллостерически регулироваться с помощью FBP и образовывать димеры и тетрамеры, тогда как PKM1 может образовывать только тетрамеры .

Изоферменты в бактериях

Многие энтеробактерии, включая E. coli , имеют две изоформы пируваткиназы, PykA и PykF, которые на 37 % идентичны у E. coli (Uniprot: от 27 марта 2022 на Wayback Machine , от 15 апреля 2021 на Wayback Machine ). Они катализируют ту же реакцию, что и у эукариот, а именно образование АТФ из АДФ и фосфоенолпирувата , последнюю стадию гликолиза , стадию, которая необратима в физиологических условиях. PykF аллостерически регулируется FBP, что отражает центральное положение PykF в клеточном метаболизме . Транскрипция PykF в E. coli регулируется глобальным регулятором транскрипции Cra (FruR) . Было показано, что PfkB ингибируется MgATP при низких концентрациях Fru-6P, и эта регуляция важна для глюконеогенеза .

Реакция

Пируваткиназа [КФ 2.7.1.40] — фермент класса трансфераз, катализирующий перенос остатка фосфорной кислоты с фосфоенолпировиноградной кислоты (высокоэнергетическое фосфорилированное соединение) на аденозиндифосфат (АДФ) с образованием аденозинтрифосфата (АТФ) и пирувата (пировиноградной кислоты); участвует в предпоследней реакции гликолиза . Тип реакции — субстратное фосфорилирование . Реакция необратима. Реакция катализируемая пируваткиназой требует присутствия ионов К + и Mg 2+ или Mn 2+ :

Фермент Кофактор Изменение свободной энергии
(ΔG′ о , кДж/моль)
Пируваткиназа К + ,
Mg 2+ /Mn 2+ 		−31,4

Гликолиз

Простая диаграмма, демонстрирующая заключительную стадию гликолиза, перенос фосфатной группы от фосфоенолпирувата (PEP) к аденозиндифосфату (ADP) под действием пируваткиназы с образованием одной молекулы пирувата и одной молекулы ATP .

Пируваткиназная реакция при гликолизе проходит в две стадии. Во-первых, PEP передает фосфатную группу ADP, производя ATP и енолят пирувата. Во-вторых, к енолату пирувата необходимо добавить протон, чтобы получить функциональную форму пирувата, которая требуется клетке . Поскольку субстратом для пируваткиназы является простой фосфо-сахар, а продуктом является АТФ, пируваткиназа является возможным основным ферментом для эволюции цикла гликолиза и может быть одним из самых древних ферментов во всей земной жизни. Фосфоенолпируват мог присутствовать абиотически, и было показано, что он продуцируется с высоким выходом при примитивном пути триозного гликолиза .

Было обнаружено, что в дрожжевых клетках взаимодействие дрожжевой пируваткиназы (YPK) с PEP и его аллостерическим эффектором фруктозо-1,6-бисфосфатом (FBP) усиливается присутствием Mg 2+ . Таким образом, был сделан вывод, что Mg 2+ является важным кофактором в катализе PEP в пируват пируваткиназой. Кроме того, было показано, что ион металла Mn 2+ оказывает аналогичное, но более сильное влияние на YPK, чем Mg 2+ . Связывание ионов металлов с участками связывания металлов на пируваткиназе увеличивает скорость этой реакции .

В аэробных условиях реакция, катализируемая пируваткиназой, является последней стадией гликолиза. Это один из трех этапов этого пути, ограничивающих скорость. — это более медленные, регулируемые шаги пути и, таким образом, определяют общую скорость пути. При гликолизе стадии, ограничивающие скорость, связаны либо с гидролизом АТФ, либо с фосфорилированием АДФ, в результате чего этот путь становится энергетически выгодным и по существу необратимым в клетках. Этот последний этап строго регулируется и намеренно необратим, поскольку пируват является важным промежуточным строительным блоком для дальнейших метаболических путей . После производства пирувата он либо входит в цикл Кребса для дальнейшего производства АТФ в аэробных условиях, либо превращается в молочную кислоту или этанол в анаэробных условиях.

Глюконеогенез: обратная реакция

Пируваткиназа также служит регуляторным ферментом глюконеогенеза — биохимического пути, по которому печень вырабатывает глюкозу из пирувата и других субстратов. Глюконеогенез использует неуглеводные источники для обеспечения глюкозы мозгом и эритроцитами во время голодания, когда прямые запасы глюкозы истощены . Во время голодания пируваткиназа ингибируется, таким образом предотвращая «утечку» фосфоенолпирувата от превращения в пируват ; вместо этого фосфоенолпируват превращается в глюкозу посредством каскада реакций глюконеогенеза. Хотя в нём используются аналогичные ферменты, глюконеогенез не является обратным гликолизу. Вместо этого используется путь, который позволяет избежать необратимых стадий гликолиза. Более того, глюконеогенез и гликолиз не происходят одновременно в клетке в любой данный момент, поскольку они реципрокно регулируются передачей клеточных сигналов. После завершения пути глюконеогенеза произведенная глюкоза выводится из печени, обеспечивая энергией жизненно важные ткани в состоянии голодания.

Регулирование

Гликолиз строго регулируется на трех каталитических стадиях: фосфорилирование глюкозы гексокиназой , фосфорилирование фруктозо-6-фосфата фосфофруктокиназой и перенос фосфата от PEP к AДФ с помощью пируваткиназы. В условиях дикого типа все три эти реакции необратимы, имеют большую отрицательную свободную энергию и отвечают за регуляцию этого пути . Активность пируваткиназы наиболее широко регулируется аллостерическими эффекторами, ковалентными модификаторами и гормональным контролем. Однако наиболее важным регулятором пируваткиназы является фруктозо-1,6-бисфосфат (FBP), который служит аллостерическим эффектором для фермента.

Аллостерические эффекторы

Аллостерическая регуляция — это связывание эффектора с сайтом белка, отличным от активного сайта, вызывающее конформационное изменение и изменение активности данного белка или фермента. Было обнаружено, что пируваткиназа аллостерически активируется FBP и аллостерически инактивируется АТФ и аланином . Тетрамеризации пируваткиназы способствуют FBP и серин, тогда как диссоциации тетрамера способствует L-цистеин .

Фруктозо-1,6-бисфосфат

FBP является наиболее важным источником регуляции, потому что он исходит из пути гликолиза. FBP — это промежуточный продукт гликолиза, образующийся в результате фосфорилирования фруктозо-6-фосфата . FBP связывается с аллостерическим сайтом связывания в домене C пируваткиназы и изменяет конформацию фермента, вызывая активацию активности пируваткиназы. Как промежуточное соединение, присутствующее в гликолитическом пути, FBP обеспечивает потому что чем выше концентрация FBP, тем выше аллостерическая активация и величина активности пируваткиназы. Пируваткиназа наиболее чувствительна к действию FBP. В результате остальные регуляторные механизмы служат вторичной модификацией .

Ковалентные модификаторы

Ковалентные модификаторы служат косвенными регуляторами, контролируя фосфорилирование, дефосфорилирование, ацетилирование, сукцинилирование и окисление ферментов, что приводит к активации и ингибированию ферментативной активности . В печени глюкагон и адреналин активируют протеинкиназу А , которая служит ковалентным модификатором, фосфорилируя и дезактивируя пируваткиназу. Напротив, секреция инсулина в ответ на повышение уровня сахара в крови активирует фосфопротеинфосфатазу I , вызывая дефосфорилирование и активацию пируваткиназы для увеличения гликолиза. Такая же ковалентная модификация оказывает противоположное действие на ферменты глюконеогенеза. Эта система регуляции отвечает за предотвращение бесполезного цикла за счет предотвращения одновременной активации пируваткиназы и ферментов, которые катализируют глюконеогенез .

Белок, связывающий элемент углеводного ответа (ChREBP)

Было обнаружено, что ChREBP является важным белком в транскрипции генов L-изофермента пируваткиназы. Домены ChREBP являются сайтами-мишенями для регуляции пируваткиназы глюкозой и цАМФ. В частности, ChREBP активируется высокой концентрацией глюкозы и ингибируется цАМФ. Глюкоза и цАМФ противостоят друг другу за счет регулирования ковалентных модификаторов. ЦАМФ связывается с сайтами связывания Ser196 и Thr666 ChREBP, вызывая фосфорилирование и инактивацию пируваткиназы; глюкоза связывается с сайтами связывания Ser196 и Thr666 ChREBP, вызывая дефосфорилирование и активацию пируваткиназы. В результате показано, что цАМФ и избыток углеводов играют косвенную роль в регуляции пируваткиназы .

Гормональный контроль

Чтобы предотвратить , гликолиз и глюконеогенез строго регулируются, чтобы гарантировать, что они никогда не будут работать в клетке одновременно. В результате ингибирование пируваткиназы глюкагоном, циклическим АМФ и адреналином не только останавливает гликолиз, но и стимулирует глюконеогенез. С другой стороны, инсулин препятствует действию глюкагона, циклического АМФ и адреналина, заставляя пируваткиназу функционировать нормально и прекращать глюконеогенез. Кроме того, было обнаружено, что глюкоза ингибирует и нарушает глюконеогенез, не влияя на активность пируваткиназы и гликолиз. В целом взаимодействие между гормонами играет ключевую роль в функционировании и регуляции гликолиза и глюконеогенеза в клетке .

Тормозящее действие метформина

Метформин , или диметилбигуанид , является основным средством лечения диабета 2 типа. Было показано, что метформин косвенно влияет на пируваткиназу через ингибирование глюконеогенеза. В частности, добавление метформина связано с заметным уменьшением потока глюкозы и увеличением потока лактата / пирувата из различных метаболических путей. Хотя метформин не влияет напрямую на активность пируваткиназы, он вызывает снижение концентрации АТФ. Из-за аллостерических ингибирующих эффектов АТФ на пируваткиназу снижение АТФ приводит к уменьшению ингибирования и последующей стимуляции пируваткиназы. Следовательно, увеличение активности пируваткиназы направляет метаболический поток через гликолиз, а не через глюконеогенез .

Генная регуляция

(hnRNP) могут действовать на ген PKM, регулируя экспрессию изоформ M1 и M2. Изоформы PKM1 и PKM2 представляют собой варианты сплайсинга гена PKM, которые отличаются одним экзоном. Различные типы hnRNP, такие как hnRNPA1 и hnRNPA2, проникают в ядро в условиях гипоксии и модулируют экспрессию, так что PKM2 активируется. Гормоны, такие как инсулин повышаю экспрессию PKM2 в то время как гормоны, как три-йодтиронин (Т3) и глюкагон способствуют понижению уровня ПКМ2 .

Клиническое применение

Дефицит

Генетические дефекты этого фермента вызывают заболевание, известное как . В этом состоянии недостаток пируваткиназы замедляет процесс гликолиза. Этот эффект особенно разрушителен для клеток, в которых отсутствуют митохондрии , поскольку эти клетки должны использовать анаэробный гликолиз в качестве единственного источника энергии, поскольку цикл Кребса недоступен. Например, красные кровяные тельца , которые в состоянии дефицита пируваткиназы, быстро становятся дефицитными по АТФ и могут подвергаться гемолизу . Следовательно, дефицит пируваткиназы может вызвать хроническую несфероцитарную гемолитическую анемию (CNSHA) .

Мутация гена PK-LR

Дефицит пируваткиназы обусловлен аутосомно-рецессивным признаком. У млекопитающих есть два гена пируваткиназы, PK-LR (который кодирует изозимы пируваткиназы L и R) и PK-M (который кодирует изозим пируваткиназы M1), но только PKLR кодирует изозим красной крови, который вызывает дефицит пируваткиназы. Более 250 мутаций гена PK-LR были идентифицированы и связаны с дефицитом пируваткиназы. Тестирование ДНК привело к открытию местоположения PKLR на хромосоме 1 и разработке тестов прямого секвенирования генов для молекулярной диагностики дефицита пируваткиназы .

Изменение метаболизма при ингибировании пируваткиназы

Ингибирование активных форм кислорода (АФК)

Активные формы кислорода (АФК или реактивные формы кислорода, РФК, англ. Reactive oxygen species, ROS ) представляют собой химически активные формы кислорода. Было показано, что в здоровых клетках легких человека АФК ингибируют изофермент M2 пируваткиназы (PKM2). АФК достигают этого ингибирования путем окисления Cys358 и инактивации PKM2. В результате инактивации PKM2 поток глюкозы больше не превращается в пируват, а вместо этого используется в пентозофосфатном пути, где образуется восстановительный потенциал для детоксикации АФК, что приводит к снижению ROS. Этот ингибирующий механизм важен, потому что он может предполагать, что регуляторные механизмы в PKM2 ответственны за содействие устойчивости раковых клеток к окислительному стрессу и усилению туморогенеза .

Ингибирование фенилаланином

Обнаружено, что фенилаланин действует как конкурентный ингибитор пируваткиназы в головном мозге. Хотя степень ингибирующей активности фенилаланина одинакова как для эмбриональных, так и для взрослых клеток, ферменты в эмбриональных клетках мозга значительно более уязвимы для ингибирования, чем ферменты в клетках мозга взрослых. Исследование PKM2 у детей с генетическим заболеванием мозга фенилкетонурией (PKU) показало повышенный уровень фенилаланина и снижение эффективности PKM2. Этот механизм ингибирования позволяет понять роль пируваткиназы в повреждении клеток головного мозга .

Пируваткиназа при раке

Раковые клетки обладают характерным ускоренным метаболическим механизмом, и считается, что пируваткиназа играет роль в развитии рака. По сравнению со здоровыми клетками, раковые клетки имеют повышенные уровни изоформы PKM2, особенно димера с низкой активностью. Следовательно, сывороточные уровни PKM2 используются в качестве маркеров рака. Димер с низкой активностью позволяет накапливать фосфоенолпируват (PEP), оставляя большие концентрации гликолитических промежуточных продуктов для синтеза биомолекул, которые в конечном итоге будут использоваться раковыми клетками . Фосфорилирование PKM2 с помощью митоген -активируемой протеинкиназы 1 (ERK2) вызывает конформационные изменения, которые позволяют PKM2 проникать в ядро и регулировать экспрессию гликолитического гена, необходимую для развития опухоли . В некоторых исследованиях утверждается, что во время канцерогенеза происходит сдвиг экспрессии с PKM1 на PKM2. Микроокружение опухоли, такое как гипоксия, активирует факторы транскрипции, такие как фактор, индуцируемый гипоксией , чтобы способствовать транскрипции PKM2, которая образует петлю положительной обратной связи для усиления собственной транскрипции.

Распространение аномалий эритроцитов по всему миру

Альтернативы

Обратимый фермент с аналогичной функцией, (PPDK), обнаружен у некоторых бактерий и был перенесен в ряд анаэробных групп эукариот (например, , Giardia , и Trichomonas ), по-видимому, через горизонтальный ген перевод в двух или более случаях. В некоторых случаях один и тот же организм будет иметь и пируваткиназу, и PPDK .

Примечания

  1. "Human pyruvate kinase M2: a multifunctional protein". Protein Science . 19 (11): 2031—44. November 2010. doi : . PMID .
  2. . Biochemical Society Transactions . 18 (2): 193—6. April 1990. doi : . PMID .
  3. "Double role for pyruvate kinase type M2 in the expansion of phosphometabolite pools found in tumor cells". Critical Reviews in Oncogenesis . 3 (1—2): 91—115. 1992-01-01. PMID .
  4. "The M1- and M2-type isozymes of rat pyruvate kinase are produced from the same gene by alternative RNA splicing". The Journal of Biological Chemistry . 261 (29): 13807—12. October 1986. PMID .
  5. "Structural basis for tumor pyruvate kinase M2 allosteric regulation and catalysis". Biochemistry . 44 (27): 9417—29. July 2005. doi : . PMID .
  6. "Turning on a fuel switch of cancer: hnRNP proteins regulate alternative splicing of pyruvate kinase mRNA". Cancer Research . 70 (22): 8977—80. November 2010. doi : . PMID .
  7. ↑ "Posttranslational Modifications of Pyruvate Kinase M2: Tweaks that Benefit Cancer". Frontiers in Oncology . 8 : 22. 2018. doi : . PMID . {{ cite journal }} : Википедия:Обслуживание CS1 (не помеченный открытым DOI) ( ссылка )
  8. ↑ "The allosteric regulation of pyruvate kinase". The Journal of Biological Chemistry . 275 (24): 18145—52. June 2000. doi : . PMID .
  9. "In vitro binding of the pleiotropic transcriptional regulatory protein, FruR, to the fru, pps, ace, pts and icd operons of Escherichia coli and Salmonella typhimurium". Journal of Molecular Biology . 234 (1): 28—44. November 1993. doi : . PMID .
  10. . Molecular Microbiology . 16 (6): 1157—69. June 1995. doi : . PMID .
  11. . Journal of Bacteriology . 178 (12): 3411—7. June 1996. doi : . PMID .
  12. "Pleiotropic regulation of central carbohydrate metabolism in Escherichia coli via the gene csrA". The Journal of Biological Chemistry . 270 (49): 29096—104. December 1995. doi : . PMID .
  13. Nelson D. L., Lehninger A. L., Cox M. M. Lehninger principles of biochemistry. – Macmillan, 2008, p.237-38
  14. "Phosphoenolpyruvate and Mg2+ binding to pyruvate kinase monitored by infrared spectroscopy". Biophysical Journal (англ.) . 98 (9): 1931—40. May 2010. Bibcode : . doi : . PMID .
  15. "Prebiotic synthesis of phosphoenol pyruvate by α-phosphorylation-controlled triose glycolysis". Nature Chemistry . 9 (4): 310—317. April 2017. doi : . PMID .
  16. "Kinetic linked-function analysis of the multiligand interactions on Mg(2+)-activated yeast pyruvate kinase". Biochemistry . 40 (43): 13097—106. October 2001. doi : . PMID .
  17. ↑ . — 2002. — ISBN 978-0-7167-3051-4 .
  18. "Pyruvate kinase. Classes of regulatory isoenzymes in mammalian tissues". European Journal of Biochemistry . 37 (1): 148—56. August 1973. doi : . PMID .
  19. "Synergistic Allosteric Mechanism of Fructose-1,6-bisphosphate and Serine for Pyruvate Kinase M2 via Dynamics Fluctuation Network Analysis". Journal of Chemical Information and Modeling . 56 (6): 1184—1192. June 2016. doi : . PMID .
  20. "Serine is a natural ligand and allosteric activator of pyruvate kinase M2". Nature . 491 (7424): 458—462. November 2012. Bibcode : . doi : . PMID .
  21. "L-cysteine reversibly inhibits glucose-induced biphasic insulin secretion and ATP production by inactivating PKM2". Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America . 112 (10): E1067-76. March 2015. Bibcode : . doi : . PMID .
  22. "Distinguishing the interactions in the fructose 1,6-bisphosphate binding site of human liver pyruvate kinase that contribute to allostery". Biochemistry . 54 (7): 1516—24. 24 February 2015. doi : . PMID .
  23. "The allosteric regulation of pyruvate kinase by fructose-1,6-bisphosphate". Structure . 6 (2): 195—210. February 1998. doi : . PMID .
  24. "PKM2, a potential target for regulating cancer". Gene . 668 : 48—53. August 2018. doi : . PMID .
  25. "Activation of protein kinase and glycogen phosphorylase in isolated rat liver cells by glucagon and catecholamines". The Journal of Biological Chemistry . 252 (2): 528—35. January 1977. PMID .
  26. "Glucose and cAMP regulate the L-type pyruvate kinase gene by phosphorylation/dephosphorylation of the carbohydrate response element binding protein". Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America . 98 (24): 13710—5. November 2001. Bibcode : . doi : . PMID .
  27. "Hormonal control of pyruvate kinase activity and of gluconeogenesis in isolated hepatocytes". Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America . 73 (8): 2762—6. 1976. Bibcode : . doi : . PMID .
  28. "Metformin decreases gluconeogenesis by enhancing the pyruvate kinase flux in isolated rat hepatocytes". European Journal of Biochemistry . 213 (3): 1341—8. 1993. doi : . PMID .
  29. "The alternative splicing repressors hnRNP A1/A2 and PTB influence pyruvate kinase isoform expression and cell metabolism". Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America . 107 (5): 1894—9. February 2010. doi : . PMID .
  30. "Insulin enhances metabolic capacities of cancer cells by dual regulation of glycolytic enzyme pyruvate kinase M2". Molecular Cancer . 12 (1): 72. July 2013. doi : . PMID . {{ cite journal }} : Википедия:Обслуживание CS1 (не помеченный открытым DOI) ( ссылка )
  31. "Erythrocyte pyruvate kinase deficiency: 2015 status report". American Journal of Hematology . 90 (9): 825—30. September 2015. doi : . PMID .
  32. "Red cell glycolytic enzyme disorders caused by mutations: an update". Cardiovascular & Hematological Disorders Drug Targets . 9 (2): 95—106. June 2009. doi : . PMID .
  33. "Inhibition of pyruvate kinase M2 by reactive oxygen species contributes to cellular antioxidant responses". Science . 334 (6060): 1278—83. December 2011. Bibcode : . doi : . PMID .
  34. "The M2 splice isoform of pyruvate kinase is important for cancer metabolism and tumour growth". Nature . 452 (7184): 230—3. March 2008. Bibcode : . doi : . PMID .
  35. "Phenylketonuria: phenylalanine inhibits brain pyruvate kinase in vivo". Science . 179 (4076): 904—6. March 1973. Bibcode : . doi : . PMID .
  36. "Inhibition of human brain pyruvate kinase and hexokinase by phenylalanine and phenylpyruvate: possible relevance to phenylketonuric brain damage". Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America . 63 (4): 1365—9. August 1969. Bibcode : . doi : . PMID .
  37. "ERK1/2-dependent phosphorylation and nuclear translocation of PKM2 promotes the Warburg effect". Nature Cell Biology . 14 (12): 1295—304. December 2012. doi : . PMID .
  38. "Reconstructing the mosaic glycolytic pathway of the anaerobic eukaryote Monocercomonoides". Eukaryotic Cell (Free full text) . 5 (12): 2138—46. December 2006. doi : . PMID . {{ cite journal }} : |format= требует |url= ( справка )

Ссылки

Источник —

ainsleigh
  • 2021-04-04
  • 1
  • Tags:

Same as Пируваткиназа

The title for the last searches