Аллофикоцианин (от Греческого : ἄλλος (аллос) — «другой», φύκος (фикос) — «водоросль», и κυανός (кианос) — «голубой») — светособирающий белок из семейства , в которое так же входят фикоцианин , фикоэритрин и фикоэритроцианин , и является вспомогательным пигментом для хлорофилла . Все фикобилипротеины растворимы в воде и следовательно не могут быть закреплены на мембране как каротиноиды , а вместо этого формируют закреплённые на мембране кластеры, называемые фикобилисомами . Аллофикоцианин поглощает и излучает красный свет (650 и 660 нм соответственно), и легко обнаруживается у цианобактерий и красных водорослях . Способность фикобилинов испускать свет используется в наборах иммунологического анализа. Аллофикоцианин довольно часто используют в проточной цитометрии , при счёте и сортировке клеток, и микроскопии . Для этого в него внедряют химическую сшивку.

Строение

Аллофикоцианин можно выделить из разных видов красных или сине-зелёных водорослей, каждый из которых синтезирует свою, несколько отличающуюся от других форму этой молекулы. Белок состоит из двух типов субъединиц (α и β), каждая несёт по одной хромофорной группе фикоцианобилина . Общую формулу белка можно описать как (αβ) ₃ . Молекулярная масса аллофикоцианина 105 кДа.

Спектральные характеристики

Максимум поглощения	652 нм
Добавочный максимум поглощения	625 нм
Максимум излучения	657.5 нм
Сдвиг Стокса	5.5 нм
Коэффициент экстинкции	2.4 x 10 5 M −1 см −1
Квантовый выход	0.68
Яркость	1.6 x 10 5 M −1 см −1

Сшитый аллофикоцианин

Как упоминалось выше, чтобы использовать аллофикоцианин в иммунологическом анализе, его необходимо химически сшить, чтобы предотратить диссоциацию его субъединиц, что довольно часто происходит в стандартных физиологических буферах. Традиционным методом для этого служит смешивание с 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимидом — мощным сшивочным агентом. Затем его обрабатывают восьми молярным раствором мочевины , а затем дают ренатурировать, но уже в физиологическом буфере. Такая процедура позволяет избавится от несшившихся субъединиц. Существуют альтернативные способы, использование которых позволяет сохранить нативную структуру тримера и получить более яркий конечный продукт .

Примечания