Микросателлиты
- 1 year ago
- 0
- 0
Примеры микросателлитного анализа
Микросателли́ты , или короткие тандемные ( простые ) повторы , — варьирующие участки ( локусы ) в ядерной ДНК и ДНК органелл ( митохондрий и пластид ), состоящие из тандемно повторяющихся мономеров длиной меньше 9 пар оснований и образующие поля менее 1 тысячи пар оснований . Являются широко распространёнными молекулярными маркерами в генетических и геномных исследованиях.
Для обозначения этого класса повторов в научной литературе могут употребляться следующие термины, а также образованные от них английские аббревиатуры :
это короткий тандемный повтор на Y-хромосоме. Y-STR часто используются в криминалистике, тестах на отцовство и генеалогического ДНК-тестирования.
Микросателлиты характеризуются высокой скоростью изменения последовательностей, обусловленной «проскальзыванием» при репликации ДНК и точечными мутациями . Обладают высокой степенью полиморфизма .
В отличие от сателлитных ДНК микросателлиты локализованы в эухроматиновой части генома .
Амплифицированные с помощью ПЦР фрагменты, включающие микросателлитные локусы с фланкирующими последовательностями, разделяют посредством гель-электрофореза или капиллярного электрофореза . По длине фрагментов судят о количестве коротких тандемных повторов и об аллелях локуса.
Увеличение числа повторяющихся элементов микросателлитов, локализованных в экзонах , в нетранслируемых или регуляторных участков генов, может быть причиной развития некоторых заболеваний у человека. К числу таких заболеваний относятся: болезнь Хантингтона , , спиноцеребеллярная атаксия , синдром ломкой X-хромосомы , атаксия Фридрейха , миотоническая дистрофия 1-го и 2-го типов .
Микросателлиты используются как молекулярные маркеры в определении генетического разнообразия , родства , принадлежности к конкретной популяции , для исследования гибридизации , эволюционных процессов . Применяются также для поиска паралогов .
Микросателлитные последовательности с повторами небольшой длины, 2—6 нуклеотидов , используются при картировании геномов , в работе с редкими видами и т. д.
Микросателлиты стали удобными и предпочтительными маркерами и нашли самое широкое применение при оценке генетического разнообразия сельскохозяйственных видов растений и животных . В 1995 году созданная под эгидой Продовольственной и сельскохозяйственной организации ООН (ФАО) рабочая группа экспертов предложила план «Глобального проекта по поддержанию (оценке) генетического разнообразия домашних животных» ( Global Project for the Maintenance (or Measurement) of Domestic Animal Genetic Diversity , сокращённо — MoDAD ) . Проект предусматривал задачу количественно оценить генетическое разнообразие среди пород основных 14 видов животных, разводимых человеком, включая четыре вида птиц . Для этой цели предполагалось генотипировать от 6 до 50 пород одного вида с помощью 30 микросателлитных локусов. Примерами успешного апробирования и воплощения рекомендаций рабочей группы MoDAD стали результаты научного проекта европейского консорциума AVIANDIV (по изучению генетического разнообразия более 50 популяций кур ) и ряда других исследований на основе микросателлитных маркеров .
Известны электронные базы данных , в которых содержится информация о микросателлитных локусах .
Анализ коротких тандемных повторов — относительно новая технология генетической экспертизы, ставшая популярной в середине-конце 1990-х годов. Анализ коротких тандемных повторов используют для получения «генетического паспорта» личности. Используемые в настоящее время для патолого-анатомического анализа короткие тандемные повторы — это четырёх- или пятинуклеотидные повторы, поскольку эти повторы обеспечивают высокую вероятность получения безошибочных данных, достаточно массивных, чтобы им не угрожала деградация в неблагоприятных условиях. При этом краткие повторы могут подвергаться воздействию неблагоприятных факторов, таких, как запинания при полимеразной цепной реакции (ПЦР) и предпочтительная амплификация ; кроме того, некоторые генетические болезни связаны с трёхнуклеотидными повторами, например, болезнь Хантингтона . Более длинные повторяющиеся последовательности чаще страдают от деградации под воздействием природных факторов, и не амплифицируются с помощью ПЦР так эффективно, как более короткие последовательности.
Анализ выполняется путём выделения ядерной ДНК из клеток исследуемого патологоанатомического образца и последующей амплификации конкретных полиморфных участков выделенной ДНК при помощи ПЦР. Амплифицированные последовательности разделяют при помощи гель-электрофореза или капиллярного электрофореза , что позволяет определить количество коротких тандемных повторов. Как правило, для визуализации продуктов амплификации ДНК используют интеркалирующие красители, например, бромистый этидий (EtBr). Приборы для капиллярного электрофореза также используют флюоресцентные красители.
В США было выделено 13 локусов коротких тандемных повторов в качестве основы для построения генетического профиля человека. Указанные профили хранятся локально, на уровне штатов и общефедеральном уровне в банках ДНК, таких, как . Существует и британская база данных идентификации локусов коротких тандемных повторов, известная как ( NDNAD ). В отличие от американцев, британская база основана на 10, а не 13 локусах.
Изучение коротких тандемных повторов в ДНК Y-хромосом часто используют для выявления генеалогии .
{{
cite conference
}}
:
templatestyles stripmarker в
|location=
на позиции 7 (
справка
)
Википедия:Обслуживание CS1 (location) (
ссылка
)
(англ.)