Interested Article - Амплификация (молекулярная биология)

Амплификация ( лат. amplificatio — усиление, увеличение), в молекулярной биологии — процесс образования дополнительных копий участков хромосомной ДНК , как правило, содержащих определённые гены либо сегменты структурного гетерохроматина . Амплификация может быть ответом клеток на селективное воздействие (например, при действии метотрексата ). Амплификация — один из механизмов активации онкогенов в процессе развития опухоли, например, онкогена N-myc при развитии нейробластомы. Также амплификация — накопление копий определенной нуклеотидной последовательности во время ПЦР — полимеразной цепной реакции .

Процесс удвоения

Выделенную молекулу ДНК нагревают, затем она распадается на две нити. Добавляют праймеры . Затем смесь ДНК и праймеров охлаждают. При этом праймеры, при наличии в смеси ДНК искомого гена, связываются с его комплементарными участками. Далее к смеси ДНК и праймера добавляют ДНК-полимеразу и нуклеотиды . Устанавливают температуру, оптимальную для функционирования ДНК-полимеразы (37 °С). В этих условиях, в случае комплементарности ДНК гена и праймера , происходит присоединение нуклеотидов к З'-концам праймеров, в результате чего синтезируются две копии гена. После этого цикл повторяется снова, при этом количество ДНК гена будет увеличиваться каждый раз вдвое. Проводят реакцию в специальных приборах — амплификаторах .

Примечания

  1. Дата обращения: 3 ноября 2011. 6 января 2011 года.
Источник —

Same as Амплификация (молекулярная биология)