Окраска гематоксилином и эозином (окраска гематоксилин-эозином) — один из самых распространённых методов окраски в гистологии . Широко используется в медицинской диагностике , в частности в онкологии для окраски удаленной или полученной при биопсии ткани.

Окраска включает использование основного красителя гематоксилина , окрашивающего базофильные клеточные структуры ярко-синим цветом, и спиртового кислого красителя эозина Y , окрашивающего эозинофильные структуры клетки красно-розовым цветом. Базофильные структуры, как правило, это те, которые содержат нуклеиновые кислоты ( ДНК и РНК ): клеточное ядро , рибосомы и РНК-богатые участки цитоплазмы . Эозинофильные структуры содержат внутри- и внеклеточные белки , например, тельца Леви . Цитоплазма является эозинофильной средой. Эритроциты всегда прокрашиваются ярко-красным цветом.

Техника окраски гематоксилин-эозином

1. Удаляют парафин из срезов в орто- ксилоле или толуоле , проводят по спиртам нисходящей концентрации и доводят до воды (две порции ксилола или толуола – 3-5 минут, 96° этанол – 3 минуты, 80° этанол – 3 минуты, 70° этанол – 3 минуты, дистиллированная вода – 5 минут).
2. Окрашивают гематоксилином 7-10 минут (в зависимости от зрелости красителя).
3. Промывают в дистиллированной воде – 5 минут.
4. Дифференцируют в 1% соляной кислоты на 70° этаноле до побурения срезов.
5. Промывают дистиллированной водой, а затем слабым (0,5 %) раствором аммиака до посинения срезов.
6. Окрашивают водным раствором эозина 0,5-1 минуту (в зависимости от желаемой окраски).
7. Промывают в трех порциях дистиллированной воды для удаления избытка эозина.
8. Удаляют воду из срезов в одной порции 70° этанола, двух порциях 96° этанола. Экспозиция в каждой порции спирта – 2 минуты.
9. Просветляют срезы в двух порциях карбол-ксилола (смесь расплавленного фенола и ксилола либо толуола в соотношении 1:4 или 1:5) – 1 минута.
10. Производят окончательное обезвоживание срезов в двух порциях ксилола или толуола. Пребывание срезов 2 минуты.
11. Заключают срезы в канадский бальзам или синтетическую среду для заключения гистологических срезов.

Некоторые структуры плохо прокрашиваются гематоксилином и эозином (как правило, гидрофобные ) и требуют иных методов окраски. Например, участки клеток, богатые липидами и миелином , остаются неокрашенными: адипоциты , миелиновая оболочка аксонов нейронов , мембрана аппарата Гольджи и др.

См. также

• Краситель Романовского — Райта

Ссылки

• от 26 сентября 2007 на Wayback Machine
• от 5 марта 2022 на Wayback Machine