Interested Article - Электрофорез в полиакриламидном геле

Электрофорез в полиакриламидном геле ( сокр. электрофорез в ПААГ, ПААГ электрофорез; англ. PAGE, Polyacrylamide Gel Electrophoresis ) — метод молекулярной биологии и биохимии, используемый для разделения белков и нуклеиновых кислот , основанный на движении заряженных биологических макромолекул в постоянном электрическом поле . Разделение в полиакриламидном геле происходит за счёт различий заряда разделяемых молекул и отличий молекулярных масс , а также от конфигурации молекул. Различают т. н. неденатурирующий, или нативный ПААГ-электрофорез (при котором разделяемые биологические макромолекулы в процессе электрофореза остаются в нативном состоянии) и денатурирующий ПААГ-электрофорез (при котором пробы предварительно денатурируют , в случае нуклеиновых кислот используют непродолжительное нагревание пробы с формамидом либо глиоксалем , для денатурации белков обычно используют кипячение пробы в буфере, содержащем сильный ионный детергент (обычно додецилсульфат натрия ) и агент, разрушающий четвертичную структуру белка за счёт разрушения дисульфидных мостиков между глобулами белка и внутри полипептидной цепи — ). В процессе денатурирующего ПААГ-электрофореза молекулы сохраняются в денатурированном состоянии за счёт наличия в геле хаотропных агентов (обычно мочевины ) в случае ПААГ-электрофореза нуклеиновых кислот и белков и наличия ионных (например додецилсульфата натрия, ) и неионных (например ) детергентов.

В случае электрофореза белков в полиакриламидном геле метод обычно используют в модификации Леммли ( Laemmli )
Также электрофорез в полиакриламидном геле применяют для разделения коротких фрагментов нуклеиновых кислот, например, ДНК-электрофорез , например, при секвенировании по Сэнгеру . Кроме этого, ПААГ-электрофорез применяют для визуализации в методах ПДРФ и ПЦР .
Различают также т. н. (от англ. discontinuous ), при котором в геле в процессе электрофоретического разделения белков на границе между концентрирующим и разделяющим гелями создаётся градиент pH , за счёт чего достигается лучшее разделение белковых молекул.