Шокола́дный ага́р ( устар. агар с гретой кровью ) — представляет собой питательную среду , обогащённую лизированной высокой температурой кровью или гемоглобином , которая применяется для выделения и культивирования патогенных бактерий с высокими питательными потребностями . Питательная среда получила название за характерный цвет и не содержит в своём составе шоколад или какао . Условно шоколадный агар можно назвать разновидностью кровяного агара , однако эти среды различаются по назначению и способу приготовления.

Состав и приготовление

В качестве основы шоколадного агара используют широкий спектр плотных питательных сред, применяемых в микробиологии . К расплавленной стерильной основе добавляют 5-10 % крови животных и прогревают на водяной бане при температуре около 80 °C в течение 5 минут, для того чтобы лизировать эритроциты и инактивировать ферменты, разрушающие фактор роста V . В некоторых случаях, например при использовании крови свиней или коз, температура прогревания может составлять 100 °C, а время прогревания увеличивают до 15 минут .

Зачастую для приготовления шоколадного агара вместо крови используют стерилизованную в автоклаве суспензию , приготовленную из сухого гемоглобина. В связи с тем, что гемоглобин не является полноценной заменой крови, в питательную среду добавляют синтетические ростовые добавки, содержащие НАД , необходимый для роста бактерий рода Haemophilus , а также витамины и вещества, стимулирующие рост гонококков и менингококков .

Применение

Шоколадный агар используют для выращивания требовательных к питательной среде бактерий , таких как гонококк ( Neisseria gonorrhoeae ) и менингококк ( Neisseria meningitidis ) . Кроме того, некоторые патогенные бактерии (в частности, Haemophilus influenzae ) нуждаются в дополнительных факторах роста V и X , которые находятся внутри красных клеток крови ( эритроцитов ). Для успешного выращивания таких бактерий необходимы лизированные (разрушенные методом медленного нагревания) эритроциты. Температура в 80 °C также инактивирует ферменты , которые могли бы метаболизировать NAD ( Никотинамидадениндинуклеотид ).

В отличие от кровяного агара, при культивировании микроорганизмов на шоколадном агаре не происходит гемолиза . При этом, некоторые α- и β-гемолизирующие микроорганизмы, выделяющие перекись водорода , образуют на шоколадном агаре зоны позеленения, сходные с α-гемолизом .

Добавление бацитрацина к шоколадному агару делает его элективной питательной средой, избирательной для рода . Вариант шоколадного агара Thayer-Martin содержит целый ассортимент антибиотиков и является элективной питательной средой для культивирования различных видов грамотрицательных диплококков рода Neisseria .

См. также

• Агар-агар
• Питательная среда
• Чашка Петри
• Кровяной агар

Примечания