Interested Article - Красный флуоресцентный белок

Красный флуоресцентный белок (КФБ) ( англ. Red fluorescent protein, RFP ) — белок - флуорофор , выделенный из кораллов рода Discosoma отряда морских анемон , который при возбуждении флуоресцирует в красно-оранжевом диапазоне. Кроме этого, с помощью направленного мутагенеза из натурального белка было получено несколько вариантов с различными спектральными характеристиками , включая варианты, флуоресцирующие в оранжевом, красном и инфракрасном диапазоне .

История

Красный флуоресцентный белок drFP583 был впервые описан в 1999 году. Он был получен из красных кораллов Discosoma sp. наряду с несколькими другими флуоресцирующими белками, выделенными из нескольких видов небиолюминесцентных кораллов .

Функции в природе

Считается, что белок играет роль в фотопротекции фотосинтетической системы симбиотических коралловых микроводорослей от фотоингибирования, вызванного высокой интенсивностью света на поверхности кораллового рифа . В глубокой воде флуоресценция может конвертировать коротковолновый синий свет в более длинноволновый, который является более подходящим для фотосинтеза коралловых микроводорослей .

Структура и свойства

Натуральный красный флуоресцентный белок DsRed ( drFP583 ) имеет молекулярную массу 25,9 кДа и является тетрамером. Максимум поглощения — 558 нм, максимум испускания — 583 нм . Кроме этого, есть минорный максимум поглощения — 494 нм.

Путём направленного мутагенеза был получен целый ряд белковых флуорофов с улучшенными параметрами стабильности структуры, квантового выхода и разнообразными спектрами флуоресценции . Среди улучшенных флуоресцирующих белков, сгенерированных из DsRed , такие как mFruits (mCherry, mOrange, mRaspberry), mKO, TagRFP, mKate, mRuby, FusionRed, DsRed-Express .

В биотехнологии

Флуоресцентные белки являются ключевым компонентом при генерации химерных белков, в которых они действуют как флуоресцирующий маркёр. Как правило, эти белки остаются стабильными флуорофорами при пришивке различных белка как с N-, так и с C-конца. Они были экспериментально экспрессировны во многих типах клеток и живых организмов. Среди применений — мечение клеточной линии, репортер генной экспрессии, исследование белок-белковых взаимодействий .

См. также

Примечания

Bevis, Brooke J.; Glick, Benjamin S. (англ.) // Nature Biotechnology . — Nature Publishing Group , 2002. — Т. 20 , № 1 . — С. 83—87 . — ISSN . — doi : . 21 марта 2019 года.
Miyawaki, Atsushi; Shcherbakova, Daria M; Verkhusha, Vladislav V. Red fluorescent proteins: chromophore formation and cellular applications (англ.) // Current Opinion in Structural Biology : journal. — 2012. — October ( vol. 22 , no. 5 ). — P. 679—688 . — ISSN . — doi : . — PMC .
Matz M. V., Fradkov A. F., Labas Y. A., Savitsky A. P., Zaraisky A. G., Markelov ML et al. (англ.) // Nature Biotechnology : journal. — Nature Publishing Group , 1999. — Vol. 17 , no. 10 . — P. 969—973 . — doi : . — .
↑ . Дата обращения: 28 февраля 2019. 1 марта 2019 года.
Remington, S. James. (англ.) // Nature Biotechnology . — Nature Publishing Group , 2002. — 1 января ( т. 20 , № 1 ). — С. 28—29 . — doi : . 21 октября 2021 года.
Shaner N. C., Campbell R. E., Steinbach P. A., Giepmans B. N., Palmer A. E., Tsien R. Y. (англ.) // Nature Biotechnology : journal. — Nature Publishing Group , 2004. — Vol. 22 , no. 12 . — P. 1567—1572 . — doi : . — .
Piatkevich, Kiryl D.; Verkhusha, Vladislav V. Guide to Red Fluorescent Proteins and Biosensors for Flow Cytometry (англ.) // Methods in cell biology : journal. — 2011. — Vol. 102 . — P. 431—461 . — ISSN . — doi : . — PMC .
Bindels, Daphne S; Haarbosch, Lindsay. (англ.) // Nature Methods . — 2017. — Т. 14 , № 1 . — С. 53—56 . — ISSN . — doi : . 27 марта 2019 года.