Interested Article - Электрофорез белков

Белки дрожжей , разделённые с помощью электрофореза в полиакриламидном геле , с применением кумасси для окрашивания белковых фракций. В первой дорожке слева — белковый маркер молекулярной массы

Электрофоре́з белко́в — способ разделения смеси белков на фракции или индивидуальные белки, основанный на движении заряженных белковых макромолекул различного молекулярного веса в стационарном электрическом поле . Электрофорез белков применяют как для анализа компонентов смеси белков, так и для получения гомогенного белка. Наиболее распространенным вариантом электрофоретического анализа белков является электрофорез белков в полиакриламидном геле по .

Варианты метода электрофореза белков

Существует множество разновидностей и модификаций данного метода, которые используются (или использовались в определённые периоды развития биохимии и молекулярной биологии ) в различных областях :

  • Электрофорез в свободных средах (без поддерживающей среды)
    • Электрофорез с подвижной границей
    • Зональный электрофорез без поддерживающей среды
  • Зональный электрофорез в поддерживающей среде с капиллярной структурой
  • Капиллярный электрофорез

Электрофорез белков подразделяется также на одномерный и двумерный (2D) электрофорез , препаративный и аналитический, а также электрофорез и электрофорез в присутствии детергента денатурирующих условиях). Разновидностью метода электрофореза являются изоэлектрическое фокусирование и изотахофорез . В случае использования иммунологических методов для выявления разделённых белков говорят про иммуноэлектрофорез .

В зависимости от конструкции электрофоретического аппарата различают горизонтальный и вертикальный электрофорез белков.

История и области применения

После первых экспериментов с электрофорезом, проводившихся в нескольких лабораториях в 1930-е — 1940-е годы, в том числе пионером электрофореза — нобелевским лауреатом Арне Тиселиусом , существенный прогресс в дальнейшем развитии и применении этого метода для разделения белков начался в 1955 году с разработки зонального электрофореза в крахмальном геле , которую осуществил Оливер Смитис , впоследствии также нобелевский лауреат . Метод совершенствовался и получил большое распространение в экспериментальной биохимии и молекулярной биологии.

В 1959 году был предложен метод электрофореза белков в ПААГ , в 1962 году — метод , в 1969 году — применение денатурирующих агентов ( SDS ) . В 1970 году Лэммли значительно усовершенствовал электрофорез в ПААГ, разделив 28 белковых компонентов бактериофага T4 . В 1975 году появился двумерный (2D) электрофорез .

Электрофорез белков нашёл широкое применение в биологических исследованиях, как фундаментальных , так и прикладных . Ряд вариантов метода используется и поныне; например, 2D-электрофорез является в протеомике одним из методов изучения протеома .

См. также

Примечания

  1. Schägger H. , von Jagow G. (англ.) // : журнал. — Orlando, FL , USA : Academic Press , 1987. — Vol. 166, no. 2 . — P. 368—379. — ISSN . — . (Дата обращения: 27 февраля 2015) . Дата обращения: 13 октября 2020. Архивировано 6 апреля 2018 года.
  2. . (англ.) // Nature : журнал. — London , UK : Nature Publishing Group , 1970. — Vol. 227, no. 5259 . — P. 680—685. — ISSN . — doi : . — . 27 февраля 2015 года. (Дата обращения: 27 февраля 2015)
  3. Остерман Л. А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот: электрофорез и ультрацентрифугирование (практическое пособие). — М. : Наука , 1981. — 288 с.
  4. Smithies O. (англ.) // The Biochemical Journal : журнал. — London, UK: Biochemical Society ; Portland Press , 1955. — Vol. 61, no. 4 . — P. 629—641. — ISSN . — . 27 февраля 2015 года. (Дата обращения: 27 февраля 2015)
  5. Raymond S., Weintraub L. (англ.) // Science : журнал. — Washington, D.C. , USA: American Association for the Advancement of Science , 1959. — Vol. 130, no. 3377 . — P. 711. — ISSN . — . 18 октября 2020 года. (Дата обращения: 27 февраля 2015) . Дата обращения: 13 октября 2020. Архивировано 6 октября 2017 года.
  6. O'Farrell P. H. (англ.) // The Journal of Biological Chemistry : журнал. — Baltimore, MD , USA: American Society for Biochemistry and Molecular Biology , 1975. — Vol. 250, no. 10 . — P. 4007—4021. — ISSN . — . 18 января 2020 года. (Дата обращения: 27 февраля 2015) . Дата обращения: 27 февраля 2015. Архивировано 18 января 2020 года.
  7. Tiselius A. (англ.) // Transactions of the Faraday Society : журнал. — London, UK: Faraday Society , 1937. — Vol. 33. — P. 524—531. — ISSN . — doi : . 10 августа 2020 года. (Дата обращения: 28 февраля 2015) . Дата обращения: 13 октября 2020. Архивировано 10 августа 2020 года.
  8. / Ed. by M. Bier. — 3rd printing edn. — New York, NY , USA: Academic Press, 1964. — P. 225. — 563 p. 5 октября 2017 года. (англ.) (Дата обращения: 27 февраля 2015) . Дата обращения: 27 февраля 2015. Архивировано 5 октября 2017 года.
  9. Smithies O. (англ.) // The Biochemical Journal : журнал. — London, UK: Biochemical Society; Portland Press, 1959. — Vol. 71, no. 3 . — P. 585—587. — ISSN . — . 27 февраля 2015 года. (Дата обращения: 27 февраля 2015)
  10. Gahne B. (англ.) // Genetics : журнал. — Baltimore, MD, USA: Genetics Society of America , 1966. — Vol. 53, no. 4 . — P. 681—694. — ISSN . — . 5 октября 2017 года. (Дата обращения: 27 февраля 2015) . Дата обращения: 27 февраля 2015. Архивировано 5 октября 2017 года.
  11. Ornstein L., Davis B. J. Disc Electrophoresis. — Rochester, NY , USA: Distillation Products Industries, Eastman Kodak Co. , 1962. (англ.)
  12. Weber K., Osborn M. (англ.) // The Journal of Biological Chemistry : журнал. — Baltimore, MD, USA: American Society for Biochemistry and Molecular Biology, 1969. — Vol. 244, no. 16 . — P. 4406—4412. — ISSN . — . 12 мая 2019 года. (Дата обращения: 27 февраля 2015) . Дата обращения: 13 октября 2020. Архивировано 18 января 2020 года.
  13. Hunter R. L., Merkert C. L. Histochemical demonstration of enzymes separated by zone electrophoresis in starch gels // Science. — 1957. — Vol. 125. — P. 1294—1295. (англ.)
  14. Baker C. M. A. (англ.) // Genetics : журнал. — Baltimore, MD, USA: Genetics Society of America, 1968. — Vol. 58, no. 2 . — P. 211—226. — ISSN . — . 15 октября 2020 года. (Дата обращения: 27 февраля 2015) . Дата обращения: 27 февраля 2015. Архивировано 6 октября 2017 года.
  15. Baker C. M. A., Croizier G., Stratil A., Manwell C. (англ.) // Advances in Genetics : журнал. — New York, NY, USA: Academic Press, 1970. — Vol. 15. — P. 147—174. — ISSN . — . 13 октября 2020 года. (Дата обращения: 27 февраля 2015) . Дата обращения: 13 октября 2020. Архивировано 13 октября 2020 года.
  16. Romanov M. N. (1988-06-07). . Abstracts . 4th Symposium of Young Poultry Scientists. Kraków , Poland : World's Poultry Science Association, Polish Branch. p. 10. OCLC . из оригинала 6 октября 2017 . Дата обращения: 18 октября 2020 . (англ.)
  17. Романов М. Н. (1994-01-27). . Тез. докл . I Междунар. конф. по молекулярно-генетическим маркерам животных, Киев , 27—29 января 1994. Киев, Украина : Укр. акад. аграр. наук , Ин-т разведения и генетики животных, Ин-т агроэкологии и биотехнологии; Аграрна наука. pp. 34—35. OCLC . , TRN: RU9815007X. Архивировано из 6 октября 2017 . Дата обращения: 28 февраля 2015 .
  18. Романов М. Н. (1994-01-27). . Тез. докл . I Междунар. конф. по молекулярно-генетическим маркерам животных, Киев, 27—29 января 1994. Киев, Украина: Укр. акад. аграр. наук, Ин-т разведения и генетики животных, Ин-т агроэкологии и биотехнологии; Аграрна наука. pp. 35—36. OCLC . Архивировано из 8 августа 2020 . Дата обращения: 28 февраля 2015 . {{ cite conference }} : Неизвестный параметр |coauthors= игнорируется ( |author= предлагается) ( справка )
  19. Komatsu S., Kojima K., Suzuki K., Ozaki K., Higo K. (англ.) // Nucleic Acids Research : журнал. — Oxford , UK: Oxford University Press , 2004. — Vol. 32, no. Database issue . — P. D388—D392. — ISSN . — . 3 июня 2018 года. (Дата обращения: 28 февраля 2015) . Дата обращения: 13 октября 2020. Архивировано 3 июня 2018 года.

Литература

  • Vesterberg O. History of electrophoretic methods // Journal of Chromatography . — 1989. — Vol. 480. — P. 3—19. (англ.)

Ссылки

  • (англ.) . Fishing: Research: Gene Conservation Lab . Division of Commercial Fisheries, Alaska Department of Fish and Game , State of Alaska . — Пособие по электрофорезу в крахмальном геле. Дата обращения: 27 февраля 2015. Архивировано из 27 февраля 2015 года.
Источник —

Same as Электрофорез белков